一、抑菌圈法又叫擴(kuò)散法，是利用待測藥物在瓊脂平板中擴(kuò)散使其周圍的細(xì)菌生長受到抑制而形成透明圈，即抑菌圈，根據(jù)抑菌圈大小判定待測藥物抑菌效價(jià)的一種方法。抑菌圈法操作便捷、簡單易行、成本低廉、結(jié)果準(zhǔn)確可靠，是抑菌試驗(yàn)的經(jīng)典方法，被廣泛使用。常用于抗生素產(chǎn)生菌的分離篩選。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被檢菌能分泌某些抑制工具菌生長的物質(zhì)，如抗生素等，便會(huì)在該菌落周圍形成工具菌不能生長的抑菌圈，很容易被鑒別出來。
二、主要有K-B法(Kirby-Bauertest)、牛津杯法和打孔法三種。K-B法即濾紙片法，選用質(zhì)地均勻的濾紙，用打孔機(jī)打成直徑相同的圓片，滅菌后烘干，浸泡于待測樣品中，然后置于試驗(yàn)平板中培養(yǎng)一段時(shí)間后測定抑菌圈大小的一種方法。牛津杯法又稱杯碟法，將已滅菌的牛津杯置于試驗(yàn)平板中，往杯中注入一定量的待測樣品，培養(yǎng)一段時(shí)間后測定抑菌圈大小的一種方法。打孔法，是指用已滅菌的打孔器或鋼管在試驗(yàn)平板上打孔，往孔中注入一定量的待測樣品，培養(yǎng)一段時(shí)間后測定抑菌圈大小的一種方法。
三、菌種的活化及菌液的制備：將冷凍保存的菌種劃線接種至平板培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h；挑單菌落接種至100mL液體培養(yǎng)基，37℃、200r/min搖床培養(yǎng)過夜，菌液備用。傾注平板法：先往已滅菌的平板中接種1mL菌液，然后傾注約20mL已冷卻至50℃左右的平板培養(yǎng)基，混合均勻，水平靜置凝固后備用。預(yù)加菌液傾注平板法：往已冷卻至50℃左右的平板培養(yǎng)基中注入一定量的菌液，混合均勻，傾注平板(約20mL/平板)，水平靜置凝固后備用。
四、結(jié)果表明：打孔法操作簡單、方便快捷，獲得的抑菌圈質(zhì)量高、重復(fù)性好，是優(yōu)先選用的方法。
